Aperçu du produitKit de révélation pour mise en évidence des protéines AgNOR (argentaffines) (100 kD) sur coupes incluses en paraffine et frottis cytologiques. Référence : 04-045801. Fourniture pour 48 tests. Nombre minimal de préparations : 12 (jusqu'à 4 lames par préparation). Durée du protocole par série : 30 minutes.
Applications- Laboratoires d'histopathologie et de cytologie pour visualisation des protéines de la région organisatrice nucléolaire (NOR) en microscopie optique.
- Adapté aux coupes en paraffine et aux frottis fixés / séchés à l'air.
PrincipeLes protéines AgNOR (100 kD) agissent comme des agents réducteurs qui fixent les ions argent et conduisent à un dépôt d'argent métallique visible en microscopie optique. Juste avant l'emploi, la solution de nitrate d'argent est mélangée à un hydrocolloïde chargé positivement (par ex. gélatine) afin de favoriser le contact entre les groupes réducteurs des protéines nucléolaires et les ions argent, conduisant à une coloration argyrophile des protéines associées aux NOR.
Contenu et conservation- Taille du kit : 48 tests (minimum 12 préparations × jusqu'à 4 lames chacune).
- Durée de conservation : 1 an.
- Conditions recommandées : 15–25°C.
- Équipement complémentaire requis : baguette en verre, cuves de lavage, porte-lames non métalliques recommandés.
Méthode (résumé)- Hydrater la coupe ou le frottis avec de l'eau distillée.
- Préparer la solution de travail : verser l'intégralité du flacon A dans le récipient pour lames et ajouter 10 ml du réactif B ; agiter doucement avec une baguette en verre propre préalablement rincée à l'eau distillée.
- Incuber les coupes/lames dans la solution de travail à l'obscurité pendant 30 minutes à température ambiante.
- Rincer soigneusement dans trois bains d'eau distillée de qualité.
- Déposer 10 gouttes du réactif C sur la coupe/la lame et laisser agir 1 minute.
- Rincer à l'eau distillée, déshydrater par séries d'alcools croissants, clarifier au xylène et monter avec un milieu de montage approprié.
Avertissements- Utiliser impérativement de l'eau distillée de qualité pour tous les lavages.
- Ne pas utiliser de lames revêtues de polylysine.
- Éviter le contact avec des objets métalliques (pincettes, paniers).
- Après montage, conserver les lames à l'abri de la lumière.
- Si le réactif A présente une gélification due à un stockage à basse température, fluidifier en chauffant la bouteille sous un filet d'eau tiède avant utilisation.