Les cellules souches embryonnaires (ES) sont des cellules pluripotentes dérivées de la masse cellulaire interne du blastocyste. Les cellules souches peuvent être maintenues in vitro pendant de longues périodes sans perdre leur capacité à se différencier en toutes les lignées cellulaires lorsqu'elles sont réimplantées dans un blastocyste. Les cellules ES peuvent se différencier in vitro en divers types de cellules, y compris les progéniteurs neuronaux, musculaires, endothéliaux et hématopoïétiques. Les conditions générales de culture sont bien établies et exigent généralement que les cellules ES soient cultivées sur une couche de cellules nourricières inactives ou avec des composants de la membrane basale (Matrigel, Fibronectine, Laminine). Lors de la culture de cellules ES, l'un des paramètres les plus importants est le maintien des cellules à l'état indifférencié. Le criblage préalable du sérum est essentiel avant de l'utiliser pour la culture de cellules ES. Différents lots de sérums sont criblés pour la croissance de cellules ES humaines en utilisant des MEF comme couche nourricière. Les paramètres suivants sont mesurés pour le criblage :
Morphologie des colonies de cellules ES humaines
Efficacité de l'ensemencement
Taux de différenciation : analyse des marqueurs de surface des cellules ES humaines exprimés sur la membrane des cellules indifférenciées (analyse FACS).
Les résultats sont utilisés comme une indication de la qualité des sérums pour la croissance et le maintien des cellules souches indifférenciées.
Décongélation
Nous recommandons de décongeler le sérum à 2-8ºC. Cependant, si nécessaire, vous pouvez décongeler le sérum à température ambiante. Agiter doucement les flacons pour mélanger le sérum pendant le processus de décongélation.
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