Anticorps TurboGFP-Trap
de biochimied'imagerie cellulairede protéines

anticorps
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Caractéristiques

Type
anticorps
Applications
d'imagerie cellulaire, de biochimie
Marqueur testé
de protéines
Température de stockage

4 °C
(39 °F)

Description

Les protéines de fusion fluorescentes sont des outils populaires pour étudier la localisation des protéines et la dynamique cellulaire. Ces constructions fusionnent généralement la totalité - ou au moins un domaine fonctionnel - d'une protéine cible avec l'un des nombreux types de protéines fluorescentes rapporteuses. La protéine fluorescente verte dimérique TurboGFP est dérivée de la protéine fluorescente verte CopGFP du copépode Pontellina plumata (Shagin et al., 2004). Elle possède une fluorescence verte brillante avec un maximum d'excitation à 482 nm et un maximum d'émission à 502 nm. La TurboGFP est une protéine à maturation rapide - son signal fluorescent à l'intérieur d'une cellule est visible plus tôt que celui des autres protéines fluorescentes vertes. La TurboGFP ne partage qu'environ 20 % d'identité de séquence avec les variantes GFP des méduses. Par conséquent, la plupart des anticorps anti-GFP ne se lient pas à la TurboGFP - y compris notre GFP-Nanobody utilisé dans le GFP-Trap. Il est facile d'imager des cellules en utilisant une construction de protéine de fusion TurboGFP, mais pour obtenir une image complète, ces données d'imagerie sont souvent combinées avec des informations biochimiques supplémentaires pour la protéine (ou le domaine protéique) d'intérêt. Pour ces expériences biochimiques, une deuxième protéine de fusion est généralement conçue en utilisant un domaine "tag" différent qui permet la purification. Ces analyses in vitro supplémentaires peuvent être utilisées pour confirmer la fonctionnalité de la construction de fusion "étiquetée", ainsi que pour extraire les complexes multiprotéiques qui peuvent se former dans le milieu cellulaire. Le manque de réactifs spécifiques, fiables et efficaces a limité l'utilisation de la GFP et des protéines de fusion fluorescentes apparentées, tant pour les études de biologie cellulaire que pour les analyses biochimiques directes.

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