Isolement de l'ADN plasmidique à faible taux d'endotoxine (<1EU/µg) à partir de cultures bactériennes allant jusqu'à 200 ml à l'aide de colonnes spin maxi
Vue d'ensemble
Le kit E.Z.N.A.® Endo-Free Plasmid Maxi fournit une méthode efficace pour l'isolement à grande échelle de l'ADN plasmidique à faible teneur en endotoxines. Le système utilise des seringues filtrantes de nettoyage du lysat au lieu de la centrifugation pour nettoyer rapidement les lysats bactériens après la lyse alcaline. Après la purification du lysat, les endotoxines sont éliminées et le protocole suit une procédure simple "bind-wash-elute" pour fournir de l'ADN plasmidique de haute qualité. Les rendements varient en fonction du nombre de copies de plasmides, de la souche d'E. coli et des conditions de croissance. 50-200 ml de cultures bactériennes en milieu LB produisent généralement 0,6-1,2 mg d'ADN plasmidique à nombre de copies élevé. Jusqu'à 500 ml de culture peuvent être traités lorsque l'on travaille avec des plasmides à faible nombre de copies. Le système utilise la centrifugation ou la technologie du vide pour la purification des plasmides et élimine les colonnes à écoulement par gravité qui prennent du temps et nécessitent une précipitation à l'alcool. L'ADN plasmidique purifié convient aux applications sensibles en aval, telles que la transfection de cellules de mammifères, le clonage, le séquençage automatisé de l'ADN fluorescent (les lectures typiques dépassent 800 pb), le séquençage de nouvelle génération, la digestion par enzymes de restriction, la ligature, la PCR, la transcription in vitro, la transformation, etc.
Rapide - Purification de l'ADN plasmidique en < 45min
Sûr - Pas d'extractions au phénol/chloroforme
Polyvalent - Formats à centrifuger et sous vide disponibles
Haute qualité - ADN plasmidique de qualité transfection, à faible endotoxine (< 1 UE/µg)
Spécifications de l'ADN plasmidique
Ne pas utiliser dans les procédures de diagnostic.
CARACTÉRISTIQUES - SPÉCIFICATIONS
Application en aval - Transfection, thérapie génique, clonage, transcription in vitro, nouvelle génération
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