Ce kit ELISA utilise le principe de l'ELISA sandwich. La microplaque ELISA fournie dans ce kit a été pré-enduite avec un anticorps spécifique à l'IFN-γ de souris. Les standards ou les échantillons sont ajoutés aux puits de la microplaque ELISA et combinés à l'anticorps spécifique. Ensuite, un anticorps de détection biotinylé spécifique de l'IFN-γ de souris et un conjugué Avidine-Horseradish Peroxydase (HRP) sont ajoutés successivement à chaque puits de la microplaque et incubés. Les composants libres sont éliminés par lavage. La solution de substrat est ajoutée à chaque puits. Seuls les puits contenant l'IFN-γ de souris, l'anticorps de détection biotinylé et le conjugué Avidine-HRP apparaissent en bleu. La réaction enzyme-substrat est terminée par l'ajout de la solution d'arrêt et la couleur devient jaune. La densité optique (DO) est mesurée par spectrophotométrie à une longueur d'onde de 450 nm ± 2 nm. La valeur de la DO est proportionnelle à la concentration d'IFN-γ de souris. Vous pouvez calculer la concentration d'IFN-γ de souris dans les échantillons en comparant la DO des échantillons à la courbe standard.
Données techniques
Comme les valeurs de DO de la courbe standard peuvent varier en fonction des conditions d'exécution du test (par exemple, opérateur, technique de pipetage, technique de lavage ou effets de la température), l'opérateur doit établir une courbe standard pour chaque test. Une courbe standard et des données typiques sont fournies ci-dessous à titre de référence uniquement.
Précision
Précision intra-essai (précision au sein d'un essai) : 3 échantillons avec un niveau faible, moyen et élevé ont été testés 20 fois sur une plaque, respectivement.
Précision inter-essais (précision entre les essais) : 3 échantillons avec un niveau faible, moyen et élevé ont été testés sur 3 plaques différentes, 20 répétitions dans chaque plaque, respectivement.
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