La technologie ClonExpress est une technique de clonage d'ADN sans jonction, à la fois simple, rapide et hautement efficace. Elle permet le clonage directionnel d'inserts en n'importe quel site d'un vecteur donné. Utilisez n'importe quelle méthode pour linéariser le vecteur, puis introduisez la séquence d'extrémité du vecteur linéarisé à l'extrémité 5' de l'amorce d'amplification directe/inverse de l'insert, de sorte que les extrémités 5' et 3' du produit de PCR présentent respectivement la même séquence terminale (15 à 20 pb) que le vecteur linéarisé. Le produit de la PCR et le vecteur linéarisé sont mélangés dans une certaine proportion. Sous l’action catalytique de la recombinase, la transformation peut être réalisée à 37 °C pendant 30 minutes pour achever le clonage directionnel.
ClonExpress II est un kit de clonage recombinant de nouvelle génération. Il dispose d’un système unique indépendant de la ligase, qui réduit considérablement le bruit de fond lié à l’autoligation du vecteur, et le taux de réussite peut atteindre plus de 95 %. Un tampon de réaction hautement optimisé et une recombinase Exnase II améliorée permettent d’améliorer considérablement l’efficacité de la recombinaison et la tolérance aux impuretés. Ces caractéristiques permettent d’utiliser directement des vecteurs linéarisés et des inserts pour le clonage recombinant sans purification, ce qui simplifie considérablement les étapes expérimentales.
Caractéristiques
Bonnes performances : pas de ligase, pas d’autoligation, taux de réussite > 95 %
Large compatibilité : clonage efficace de fragments d’ADN de 50 pb à 10 kb ; applicable à un seul fragment
Caractéristiques supplémentaires : pas besoin de tenir compte du site de restriction des fragments d’insert
Assistance logicielle : mise à disposition du logiciel de conception d’amorces en ligne « CE Design »
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