Kit de réactifs solution de coloration IC400

pour la microbiologiepour bactéries

Description courte
Kit de coloration de Gram – 4 solutions prêtes à l’emploi × 250 ml – IVD – kit complet (cristal violet, Lugol, décolorant, safranine) pour la coloration différentielle des bactéries. Gram‑positifs bleu‑violet ; Gram‑négatifs rouge‑orange. Fourniture Pro‑Eko Srl.

Description
Le Kit de coloration de Gram est un kit de bactériologie diagnostique composé de quatre solutions prêtes à l’emploi (250 ml chacune), fourni par Pro‑Eko Srl en tant que dispositif médical de diagnostic in vitro (IVD). Il permet l’exécution complète de la coloration de Gram, méthode de référence en microbiologie clinique, qui classe les bactéries en Gram‑positives (épaisse couche de peptidoglycane, retient le complexe cristal violet–iode) et Gram‑négatives (couche mince et membrane externe, perd le complexe lors de la décoloration). Le kit inclut la solution de Lugol comme mordant et est conforme à la Ph. Eur. et référencé par l’ISS.

Composition du kit

• Solution 1 — Cristal Violet de Gram (0,5–1 %) : colorant primaire — colore toutes les bactéries en bleu‑violet
• Solution 2 — Lugol de Gram (solution iode–iodure) : mordant — forme le complexe cristal violet–iode
• Solution 3 — Décolorant (acétone/éthanol) : décoloration — élimine le complexe des cellules Gram‑négatives
• Solution 4 — Safranine O (0,25–0,5 %) : contre‑colorant — colore les Gram‑négatifs en rouge‑orange
• Volume par solution : 250 ml × 4 (kit 4×250 ml)
• Type de produit : Dispositif médical de diagnostic in vitro (IVD) — Règ. (UE) 2017/746

Principe de la coloration de Gram et importance clinique
La coloration de Gram repose sur les différences de structure de la paroi bactérienne : les Gram‑positifs possèdent une épaisse couche de peptidoglycane qui emprisonne le complexe cristal violet–iode lors de la décoloration à l’alcool/acétonne, apparaissant bleu‑violet ; les Gram‑négatifs ont une couche de peptidoglycane fine et une membrane externe qui permet la perte du complexe, apparaissant rouge‑orange après contre‑coloration à la safranine. La coloration de Gram est recommandée par la Ph. Eur. et utilisée comme test initial rapide en microbiologie clinique pour orienter la prise en charge empirique en attendant l’identification et les résultats de sensibilité.

Procédure de coloration de Gram

• Préparation du vetrino : étaler l’échantillon (culture ou matériel clinique) sur une lame et fixer à la flamme ou au méthanol
• Cristal Violet : couvrir avec 10 gouttes de la Solution 1 — laisser agir 3 minutes
• Lugol : égoutter sans laver — appliquer 10 gouttes de la Solution 2 — laisser agir 1 minute (formation du complexe CV–I2)
• Décoloration : égoutter — appliquer la Solution 3 en agitant pendant 10–20 secondes jusqu’à ce qu’il n’y ait plus de coloration — rincer immédiatement à l’eau distillée pour arrêter la décoloration
• Contre‑coloration : sécher partiellement — appliquer 10 gouttes de la Solution 4 — laisser agir 30–60 secondes
• Lavage final : rincer à l’eau distillée et sécher avec papier filtre ou à l’air
• Observation : examiner à 100× avec huile à immersion

Résultats
Gram‑positifs = bleu‑violet ; Gram‑négatifs = rouge‑orange.

Domaines d’application

• Microbiologie clinique : classification bactérienne rapide dans les infections (pneumonies, méningites, sepsis, infections urinaires, infections de plaies)
• Contrôle qualité pharmaceutique : tests microbiologiques des préparations stériles et non stériles (Ph. Eur.)
• Laboratoires de recherche : caractérisation de souches
• Enseignement : travaux pratiques de microbiologie
• Industrie alimentaire : contrôle microbiologique des échantillons alimentaires

Classification CLP et sécurité
Le kit contient des composants avec différentes classifications CLP : le décolorant (acétone/éthanol) est inflammable (H225) ; le cristal violet en solution peut présenter H302 ; la safranine n’a pas de classification harmonisée. Utiliser à l’écart des flammes pendant la décoloration et consulter les fiches de données de sécurité (FDS) de chaque composant. Dispositif IVD conformément au Règ. (UE) 2017/746.

Personnalisation et fabrication
Pro‑Eko Srl fabrique le kit Gram dans des formats alternatifs sur demande (par ex. 4×100 ml, 4×500 ml). Lots dédiés avec documentation technique IVD disponibles pour laboratoires accrédités et services de contrôle qualité.

Spécifications techniques

• Fabricant : Pro‑Eko Srl
• Nom commercial (modèle) : Gram Staining Kit — SKU : IC400
• Composition : 4 solutions prêtes à l’emploi (Cristal Violet 0,5–1 % ; Lugol iode–iodure ; Décolorant acétone/éthanol ; Safranine O 0,25–0,5 %)
• Volume par solution : 250 ml × 4 (kit 4×250 ml)
• Couverture estimée : ~500–800 lames par solution de 250 ml (méthode 10 gouttes, approx.)
• Type de produit / Règlement : IVD — Règ. (UE) 2017/746
• Conformité : Conforme à la Pharmacopée Européenne (Ph. Eur.) ; référencé par l’ISS
• Poids (colis) : 3 kg