Multiplexage avec de nombreux autres tests luminescents
La normalisation des données en fonction du nombre de cellules vivantes rend les résultats plus comparables à d'autres données
Fonctionnement du test
Le test de viabilité cellulaire CellTiter-Fluor™ est un test de fluorescence non lytique, à réactif unique, qui mesure le nombre relatif de cellules viables dans une population. Le test est basé sur la mesure d'une activité protéasique conservée et constitutive dans les cellules vivantes et sert donc de biomarqueur de la viabilité cellulaire. L'activité protéasique des cellules vivantes est limitée aux cellules viables intactes et est mesurée à l'aide d'un substrat peptidique fluorogène perméable aux cellules (Gly-Phe-AFC). Le substrat pénètre dans les cellules intactes, où il est clivé par l'activité de la protéase des cellules vivantes pour générer un signal fluorescent proportionnel au nombre de cellules vivantes. La protéase de la cellule vivante devient inactive après la perte de l'intégrité de la membrane et la fuite dans le milieu de culture environnant.
Multiplexage avec le test CellTiter-Fluor™
Le test CellTiter-Fluor™ peut également être utilisé dans un format multiplex séquentiel à puits unique avec d'autres chimies de dosage en aval pour normaliser les données en fonction du nombre de cellules. Les données du test peuvent servir de contrôle interne et permettre d'identifier les erreurs résultant de l'agglutination des cellules ou de la cytotoxicité des composés. Dans l'exemple de droite, l'ionomycine et le PMA agissent conjointement pour stimuler l'expression des gènes dépendant du NFAT ; cependant, une concentration plus élevée d'ionomycine entraîne une diminution de l'expression. En contrôlant simultanément la viabilité avec le CellTiter-Fluor™ Assay, il est démontré que la diminution de l'expression est due à une diminution des cellules viables.
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