Kit de test pour la recherche HTRF

de protéines totalesde cellules

Ce kit HTRF détecte le STAT6 cellulaire et peut être utilisé comme test de normalisation avec notre kit phospho-STAT6 pour une lecture optimale de la signalisation JAK/STAT. Vue d'ensemble Le kit de dosage cellulaire Total STAT6 est conçu pour contrôler le niveau d'expression de STAT6, qu'il soit phosphorylé ou non. Il est compatible avec notre kit Phospho-STAT6 et permet l'analyse des protéines phosphorylées et totales à partir d'un seul échantillon pour une meilleure lecture de la voie de signalisation JAK/STAT. Caractéristiques techniques Autres spécifications Taille de l'unité 500 points d'essai Fonctionnement Principe du test STAT6 total Le test Total STAT6 quantifie le niveau d'expression de STAT6 dans un lysat cellulaire. Contrairement au Western Blot, le test est entièrement basé sur des plaques et ne nécessite pas de gels, d'électrophorèse ou de transfert. Le test Total-STAT6 utilise deux anticorps marqués : l'un couplé à un fluorophore donneur, l'autre à un accepteur. Les deux anticorps sont hautement spécifiques d'un épitope distinct de la protéine. En présence de STAT6 dans un extrait cellulaire, l'ajout de ces conjugués rapproche le fluorophore donneur de l'accepteur et génère ainsi un signal FRET. L'intensité de ce signal est directement proportionnelle à la concentration de la protéine présente dans l'échantillon et permet d'évaluer l'expression de la protéine dans un format d'essai sans lavage. Protocole de dosage des STAT6 totaux sur 2 plaques Le protocole à 2 plaques consiste à cultiver les cellules dans une plaque à 96 puits avant de les lyser, puis de transférer les lysats dans une plaque de détection à faible volume à 384 puits avant d'ajouter les réactifs de détection Total-STAT6 HTRF. Ce protocole permet de contrôler la viabilité et la confluence des cellules.