Kit de test pour la recherche HTRF

IFN-βde cellulessérum

Le kit de détection de l'IFN-β humain HTRF est un essai immunologique conçu pour la détection et la quantification de l'IFN-β humain dans les surnageants cellulaires, dans un format homogène (sans étapes de lavage, ni de séparation). Vue d'ensemble Les interférons de type I, l'interféron alpha (IFN-α) et l'interféron bêta (IFN-β), jouent un rôle essentiel dans la réponse immunitaire innée aux infections virales. L'IFN-β est produit par les fibroblastes, les macrophages, les cellules dendritiques et les cellules endolitiques. L'expression du gène de l'IFN-β est contrôlée par des facteurs de transcription tels que IRF-3, c-Jun/ATF-2 et NF-kappaB en aval des récepteurs de reconnaissance des formes, tels que les récepteurs Toll. En particulier, l'IFN-β est le principal indicateur fonctionnel de l'activation de la voie cGas-cGAMP-STING. Une fois sécrété, l'IFN-β se lie au complexe récepteur IFNAR1/IFNAR2 et l'active, ce qui dépend des facteurs de transcription STAT1/2. La phosphorylation de STAT1/2 entraîne l'induction de l'expression des gènes antiviraux. L'évaluation des échantillons de sérum nécessite souvent une sensibilité accrue. Dans certains cas, les tests AlphaLISA peuvent avoir une sensibilité suffisante pour permettre la détection de faibles niveaux d'analytes dans le sérum ou le plasma. Principe du test Le surnageant cellulaire, l'échantillon ou l'étalon est distribué directement dans la plaque d'essai pour la détection par les réactifs HTRF® (plaque blanche à faible volume de 384 puits ou plaque à faible volume de 96 puits Revvity dans 20 µL). Les anticorps marqués avec le donneur et l'accepteur HTRF sont pré-mélangés et ajoutés en une seule étape de distribution, afin de rationaliser davantage la procédure d'essai. L'essai peut être réalisé jusqu'à un format de 1536 puits en redimensionnant simplement chaque volume d'addition proportionnellement. Analyse des données de l'essai La courbe logistique à 4 paramètres (4PL) est généralement recommandée pour l'ajustement d'une courbe standard ELISA.