Kit de réactifs en solution CellAmp™ Whole

pour PCRpour purification d'ADNpour purification d'ARN

Des cellules à l'ADNc : Kit CellAmp d'amplification du transcriptome entier pour RT-PCR Le kit d'amplification du transcriptome entier de CellAmp (temps réel), version 2, permet de passer des cellules à l'ADNc prêt à être analysé par PCR en temps réel. Lors de l'utilisation de techniques conventionnelles pour travailler avec des quantités infimes d'acides nucléiques, la perte de produit lors des étapes de purification est un problème fréquent. Cependant, ce kit cellules-ADNc assure un bon rendement du produit car les étapes de purification de l'ARN et de l'ADNc entraînant des pertes ne sont pas nécessaires. La procédure commence par la lyse des cellules, suivie d'une réaction de transcription inverse avec l'amorce de l'adaptateur dT (RT dT Primer 2) pour synthétiser l'ADNc à partir de l'ARNm. Ensuite, la désoxynucléotidyl transférase terminale (TdT) est utilisée pour ajouter une queue dA à l'ADNc synthétisé. La queue de 3' dA qui en résulte, contenant le produit ADNc, est utilisée comme modèle direct pour la PCR, ce qui permet de réduire le nombre de cycles d'amplification nécessaires. En plus de passer des cellules à l'ADNc, ce produit peut être utilisé pour amplifier l'ADNc à partir de traces d'ARN. Le kit d'amplification du transcriptome entier de CellAmp (en temps réel), version 2, utilise une étape de traitement supplémentaire de l'exonucléase I, qui permet de supprimer l'amplification non spécifique dérivée de l'amorce et d'augmenter le rendement des gènes faiblement exprimés. Le kit CellAmp Whole Transcriptome Amplification Kit (Real Time) Ver. 2 permet l'amplification directe de l'ADNc à partir d'un petit nombre de cellules. L'ADNc amplifié peut être utilisé comme modèle pour la PCR en temps réel. Lors de l'utilisation de techniques conventionnelles pour travailler avec des quantités infimes d'acides nucléiques, la perte d'acide nucléique au cours des étapes de purification est un problème fréquent.