Méthode enzymatique colorimétrique
POINT FINAL
RÉSUMÉ
Cette procédure est basée sur une méthode enzymatique améliorée, initialement conçue pour évaluer la créatinine dans le sérum et l'urine. Le test est effectué en deux étapes. Dans la première étape, la créatine est éliminée pendant les premières minutes de l'étape de préincubation de l'échantillon avec la créatinase. Dans la deuxième étape, l'addition de créatininase, qui agit également comme amorce de réaction, hydrolyse la créatinine de l'échantillon en présence de sarcosine oxydase (Sar OD) avec production de peroxyde d'hydrogène.
Créatinine + H2O Créatine
Sarcosine + H2O + O2 H2O2 + Glicine + HCHO
Le peroxyde d'hydrogène produit par la réaction d'oxydase est quantifié par une réaction de type Trinder dans laquelle le dérivé chromogène HTIB et la 4- aminoantipyrine (4-AA) sont condensés en présence de peroxydase (POD) pour former un colorant rouge de type quinoneimine.
4-AA + HTIB Quinoneimine rouge + H2O
La vitesse de développement de la couleur est proportionnelle à la concentration de créatinine dans l'échantillon.
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