Cette procédure est basée sur une méthode enzymatique améliorée, conçue à l'origine pour évaluer la créatinine sérique et urinaire. Le dosage s'effectue en deux étapes. Au cours de la première étape, la créatine est éliminée pendant les premières minutes de pré-incubation de l'échantillon avec la créatinase. Au cours de la deuxième étape, l'ajout de créatininase déclenche la réaction, hydrolysant la créatinine dans l'échantillon en présence de sarcosine oxydase (Sar OD) avec la production de peroxyde d'hydrogène:_x000D_
Créatinine + H2O → Créatine_x000D_
Sarcosine + H2O + O2 → H2O2 + Glycine + HCHO_x000D_
Le peroxyde d'hydrogène dérivé de la réaction de l'oxydase est quantifié par une réaction de type Trinder dans laquelle le dérivé chromogène HTIB et la 4-aminoantipyrine (4-AA) se condensent en présence de peroxydase (POD) pour former un colorant quinonimine rouge
4-AA + HTIB → Quinonimine + H2O_x000D_
La vitesse de développement de la couleur est proportionnelle à la concentration de créatinine dans l'échantillon.
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