Le test est basé sur la capacité réductrice des cétoamines formées par condensation non enzymatique entre le glucose et les protéines sériques (fructosamines) à réduire les sels de tétrazolium en solution alcaline en un complexe coloré mesurable par photométrie. Le sel de tétrazolium oxydé, initiateur de la réaction, est réduit par l'action de la fructosamine pour former un complexe de formazan violet.
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