Procédure de coloration rapide permettant de classer les bactéries en fonction des caractéristiques de leur paroi cellulaire. Selon les résultats de la coloration, les bactéries peuvent être divisées en deux groupes différents - Gram positif (violet) et Gram négatif (rouge).
Principe :
La coloration de Gram a été conçue empiriquement par Christian Gram, un médecin danois, en 1884. Lorsque les bactéries sont colorées avec certains colorants basiques (comme le cristal violet dans la coloration de Gram rapide), les cellules à forte teneur en peptidoglycane (Gram positif) dans leur paroi cellulaire résistent à la décoloration avec des solvants organiques tels que l'éthanol ou l'acétone, tandis que les espèces à Gram négatif (avec une fine couche de peptidoglycane dans la paroi cellulaire) peuvent être facilement décolorées.
Méthodes :
1. Colorer la lame d'échantillon avec du Crystal Violet pendant 10 secondes. Rincer doucement à l'eau, puis éliminer l'excès d'eau.
2. Appliquer une solution d'iode pendant 10 secondes. Rincer doucement à l'eau, puis éliminer l'excès d'eau.
3. Ajoutez un décolorant pendant 10 à 20 secondes. Rincez doucement à l'eau, puis éliminez l'excès d'eau.
4. Contre-colorer avec la solution de safranine pendant 10 secondes. Rincer doucement à l'eau.
5. Éponger la lame d'échantillon avec du papier absorbant (ou la laisser sécher à l'air), puis examiner la lame au microscope.
---