Le ferrocyanure de potassium est destiné à la coloration de l'hémosidérine et à la différenciation de l'hémosidérine des autres pigments.
Principe :
Le fer des tissus (à l'état ferrique) peut être libéré des protéines par de l'acide chlorhydrique dilué. Il réagit alors avec le ferrocyanure de potassium pour former du ferrocyanure ferrique bleu, ce qui est connu sous le nom de réaction au bleu de Prusse.
Méthodes :
1. Fixer les tissus dans un tampon neutre de formaldéhyde à 10 %. Déshydrater selon la méthode habituelle et incruster.
2. Désparaffiner les tissus dans de l'eau distillée. Rincer à nouveau avec de l'eau distillée.
3. Mélanger un volume égal de ferrocyanure de potassium à 2 % et d'acide chlorhydrique à 2 %. Déposer le mélange sur les lames pendant 20~30 minutes. Rincer à l'eau distillée.
4. Contre-colorer avec la solution Nuclear Fast Red pendant 5~10 minutes et rincer brièvement avec de l'eau distillée.
5. Déshydrater dans de l'éthanol à 95 % et de l'éthanol absolu, éclaircir au xylène et monter avec un milieu de montage.
Précaution :
1. Les tissus doivent être fixés avec du formaldéhyde neutre tamponné. Si du formaldéhyde ordinaire est utilisé, le tissu doit être fixé pendant une période plus courte avant l'inclusion. Les tissus fixés dans du formaldéhyde ordinaire pendant une longue période réagissent mal. Évitez d'utiliser des fixateurs contenant du chromate.
2. Il est préférable d'utiliser de l'acide chlorhydrique de qualité analytique ou supérieure, car l'acide chlorhydrique de qualité inférieure contient généralement des impuretés de fer qui peuvent entraîner des résultats faussement positifs.
3. Tous les récipients et ustensiles utilisés tout au long de la procédure doivent être propres. Éviter d'utiliser des outils en fer.
4. Pour les étapes précédant la réaction ferreuse, rincer uniquement avec de l'eau distillée afin d'éviter que le fer présent dans l'eau du robinet ne se combine au sel de calcium présent dans les tissus, ce qui entraînerait un faux positif.
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