L'hématine mature réagit avec le tungstène pour former un sédiment bleu qui se combine fortement avec le tissu. La partie brun rougeâtre est colorée par l'acide phosphotungstique.
Méthodes :
1. Placer le tissu dans du xylène. Lors de l'étape suivante, placer le tissu dans de l'eau du robinet.
2. Ajouter de l'eau distillée dans de l'alun de fer à 5 % et mordre pendant 30 minutes.
3. Rincer à l'eau distillée après un lavage à l'eau du robinet.
4. Oxyder le frottis dans du permanganate de potassium à 2,5 % et rincer à l'eau du robinet.
5. Placer dans de l'oxalate à 2,5 % jusqu'à ce que le frottis devienne blanc.
6. Rincer à l'eau du robinet, à l'eau distillée. Sécher ensuite avec du papier absorbant.
7. Placer dans le colorant PTAH pendant 12~24 heures, ou incuber pendant une heure.
8. Différencier dans de l'alcool à 95 % pendant 3 à 5 secondes (dès que possible)
Déshydrater rapidement ; clarifier et monter.
Résultats attendus :
Rhabdium, glie, fibrine, noyaux................Blue
Fibres de collagène...................................Brun rougeâtre
Précaution :
1. Ne pas rincer à l'eau après une coloration à l'acide phosphotungstique et à l'hématoxyline. Rincer rapidement dans de l'alcool à 95 %, car l'alcool ou l'eau feront disparaître la couleur rouge.
2. Ne pas sur-colorer le frottis, car l'hématoxyline phosphotungstique est un réactif de coloration progressive. Examiner au microscope dans un certain délai.
3. La procédure de coloration doit être effectuée dans un bocal de coloration.
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