PrésentationLes Kits de quantification de bibliothèques KAPA proposent une solution complète pour la quantification par qPCR des bibliothèques de séquençage de nouvelle génération (NGS), avec précision, fiabilité et reproductibilité. Les kits contiennent le KAPA SYBR FAST qPCR Master Mix (formulé avec différentes sondes de référence passives selon l'instrument qPCR), un premix d'amorces de quantification spécifique à la plateforme de séquençage, et un jeu d'étalons d'ADN pré-dilués.
Contenu- KAPA SYBR FAST qPCR Master Mix (2X) — disponible en formulation universelle et en formulations avec sondes de référence spécifiques à l'instrument (ROX High, ROX Low ou sonde instrument-spécifique)
- Premix d'amorces 10X pour quantification de bibliothèques (spécifique à la plateforme de séquençage)
- Jeu d'étalons d'ADN pré-dilués (Illumina DNA Standards 1–6)
Avantages en un coup d'œil- Réactifs complets pour quantification absolue par qPCR de bibliothèques NGS individuelles ou de pools indexés
- Courbes d'étalonnage compatibles avec plusieurs workflows de préparation de bibliothèques, y compris méthodes sans PCR
- La quantification cible uniquement les fragments aptes au séquençage
- Étandards pré-dilués présentant une forte homogénéité lot à lot pour simplifier le workflow et améliorer la reproductibilité
- Modèles d'analyse des données et support au séquençage disponibles pour faciliter les runs
Performance et fiabilitéLa polymérase KAPA SYBR FAST est formulée pour amplifier des fragments d'ADN variés avec des efficacités comparables, permettant une quantification précise sur des populations de bibliothèques hétérogènes. Les données de validation montrent des efficacités d'amplification cohérentes entre différents amplicons et lots de production, favorisant des densités de clusters reproductibles et des résultats de séquençage stables.
Applications principales- Séquençage du génome complet (WGS)
- Séquençage de l'exome complet (WES)
- Séquençage ciblé (panels personnalisés)
- RNA-Seq
- ChIP-Seq
- Séquençage d'amplicons
- Methyl-Seq
Variantes de kit disponibles et produits associés- Lib Quant Kit (ABI) — kit complet (500 réactions)
- Lib Quant Kit (Uni) — kit complet (universel ; 500 réactions)
- Lib Quant Kit (BioRad) — kit complet (500 réactions)
- Lib Quant Kit (ROX Low) — kit complet (500 réactions)
- Lib Quant Kit (LC480) — kit complet (500 réactions)
- LQ Stds 0 - 6 — jeu d'étalons d'ADN (140 réactions)
- LQ Stds — jeu d'étalons d'ADN (120 réactions)
- LQ Control Standard — étalon de contrôle (20 réactions)
- LQ Primer + KSF (Uni) — amorce + KAPA SYBR FAST (500 réactions)
- LQ Primer + KSF (LC480) — amorce + KAPA SYBR FAST (500 réactions)
Impact sur le flux de travailLa quantification par qPCR mesure les fragments aptes au séquençage, permettant d'obtenir des densités de clusters prévisibles, des pools équimolaires efficaces pour le séquençage multiplexé et une moindre nécessité de titrage de lanes. Les kits sont formulés pour fournir des résultats cohérents même avec des échantillons de qualité variable, notamment l'ADN dérivé de FFPE.
Caractéristiques / spécifications techniques- Plateforme compatible : écosystème Illumina
- Type de bibliothèque : toute bibliothèque NGS
- Matériau de départ : toute bibliothèque NGS prête pour l'amplification des clusters
- Plage de concentration de la courbe standard : 20–0,0002 pM (bibliothèques Illumina)
- Applications de séquençage : WGS, WES, séquençage ciblé, RNA-Seq, ChIP-Seq, séquençage d'amplicons, Methyl-Seq
- Température de stockage : conserver entre -15°C et -25°C