Kit de test de tuberculose cobas® MTB-RIF/INH

de diagnosticde Mycobacterium tuberculosisde Chlamydia trachomatis

Présentation
cobas® MTB-RIF/INH pour utilisation sur les systèmes cobas® 5800/6800/8800 est un test in vitro qualitatif automatisé utilisant la PCR en temps réel pour la détection directe des mutations associées à la résistance à la rifampicine dans le gène rpoB et des mutations associées à la résistance à l'isoniazide dans les gènes katG et inhA de Mycobacterium tuberculosis à partir d'échantillons respiratoires humains. Le test est prévu en test réflexe avec cobas® MTB et, conjointement aux cultures et aux tests de sensibilité aux antibiotiques, en tant qu'aide au diagnostic de M. tuberculosis multirésistant (MDR-TB).

Utilisation prévue
Pour l'analyse d'expectorations brutes, et d'expectorations digérées/décontaminées (N-acétyl-L-cystéine/NaOH) ainsi que de prélèvements de lavage broncho‑alvéolaire (LBA) ayant testé positifs pour MTBC par cobas® MTB.

Principe / Méthode
La liquéfaction et l'inactivation des mycobactéries sont réalisées avec cobas® Microbial Inactivation Solution (MIS), suivies d'une sonication. Les systèmes cobas® 5800/6800/8800 effectuent la préparation d'échantillon entièrement automatisée (extraction et purification des acides nucléiques), l'amplification par PCR en temps réel, la détection et l'attribution automatisée des résultats (positif, négatif, invalide).

Préparation et extraction des échantillons
La libération des acides nucléiques est obtenue par action chimique (MIS, cobas® omni Lysis Reagent), enzymatique (protéinase) et physique (sonication). Les acides nucléiques libérés se lient à la surface de silice des particules de verre magnétiques; les impuretés et inhibiteurs PCR sont éliminés par des étapes de lavage et l'acide nucléique purifié est élué à température élevée.

PCR et détection
Des amorces spécifiques ciblent les régions génomiques d'intérêt. Des sondes spécifiques de mutation, marquées par des fluorophores, permettent la détection simultanée du complexe MTB, des résistances à la rifampicine et à l'isoniazide sur cinq canaux de détection (les mutations liées à la rifampicine sont détectées sur trois canaux). Le master mix contient du dUTP (remplaçant le dTTP) et AmpErase (uracil‑DNA glycosylase) pour prévenir les contaminations croisées. La détection en temps réel mesure la fluorescence des sondes pendant la PCR.

Cibles détectées

• Complexe MTB (cible génomique monocopie)
• Mutations associées à la résistance à la rifampicine (gène rpoB) — 18 mutations détectées
• Mutations associées à la résistance à l'isoniazide (gène katG et région promotrice inhA) — 7 mutations détectées

Instruments destinés / flux de travail
Destiné à une utilisation sur cobas® 5800, cobas® 6800 et cobas® 8800. Les systèmes assurent la manipulation automatisée des échantillons, l'extraction des acides nucléiques, l'amplification PCR, la détection et la génération automatisée des rapports de résultats.

Informations de commande
Numéro de référence | Description du produit
09040617190 | KIT COBAS 58/68/8800 MTB-RIF/INH 192T

Avertissement réglementaire
Usage diagnostique in vitro.